苯甲酸钠(Sodiumbenzoate，SB)又称安息香酸钠，是广泛应用于食品及碳酸饮料产业中的防腐剂。多年来世界上大多数国家一直允许用SB作为食品防腐剂，zui大允许量在0.15~0.25wt%之间，在美国，SB的zui大允许量为0.1wt%。随着食品工业的发展，食品中使用防腐剂的现象十分普遍。过去曾认为SB对人体无毒，但zui近的研究表明，其可造成人体组织器官或机能的损害，具有遗传毒性，使染色体分裂出现异常，使染色体发生结构畸变以致断裂并且会产生肝硬化、肌肉损伤[4]甚至致癌[5]，Tsay等发现SB能使斑马幼虫发生畸变。长期饮用含有SB的碳酸饮料易使儿童产生多动症。因此，SB的生物安全性和对人体的危害程度必然要引起我们的重视。

       原子力显微镜(Atomicforcemicroscope，AFM)是1986年由G.Binning，C.F.Quate和C.Gerber等发明的。自发明以来它就被广泛应用于对单细胞、细胞骨架、DNA、蛋白质等生物样品及其相互作用力的研究。目前在单细胞水平上研究SB致淋巴细胞形态及其膜超微结构损伤的影响尚未见报道。本研究利用AFM在单细胞水平提供有关SB毒性的可视化证据，并探讨其损伤机制。

2、实验结果       经AFM扫描成像，获得了正常淋巴细胞、与不同浓度SB作用不同时间后的淋巴细胞的拓扑形貌图(Topography)和误差信号图(Errorsignal)，并分别对其表面超微结构进行了扫描分析，观察细胞数超过30个。检测结果发现，上述3种淋巴细胞均呈不同程度的形态结构改变。正常淋巴细胞呈较为规则的圆形，中间隆起，细胞表面总体较为平滑，高度在1.8~2.5μm之间，直径约为8~10μm。而与不同浓度SB作用后的淋巴细胞体积明显发生变化。高度减少，细胞表面形态结构更为复杂，中间部位出现明显破裂并且凹陷，呈“Y”型结构，边缘能观察到有细微损伤分布，并且随着SB浓度的增加，细胞形态进一步发生改变，呈中间凹陷状，细胞边缘向四周扁平铺展。细胞表面球状颗粒进一步增多，表面粗糙度增大，细胞高度明显减少，直径增加(高度由2μm逐渐减少至1μm，直径由6μm逐渐增加至12μm。对其局部小范围进行观察，AFM能清楚地观察到细胞膜密集的颗粒状突起物以及大量的孔洞，其中凹凸不平的细胞表面分布着大量小颗粒。选取不同细胞膜超微结构图的整个区域(5μm×5μm)进行测量，与SB作用后淋巴细胞的四个参数值均明显与正常淋巴细胞不同：对淋巴细胞膜形成的大小不一的颗粒进行统计，经SB作用后的淋巴细胞膜形成的颗粒逐渐增大。同时，随着与SB作用时间的延长，淋巴细胞出现的变化与上述情况类似，即作用时间越长，细胞损伤越严重，淋巴细胞的表面粗糙度也逐渐增加。